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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ：大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：腦組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞分離自腦組織。大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì)) 覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3) 、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積) 。半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積。大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。
由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種，相當于腦和脊髓中的巨噬細胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(C N S) 中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞的20% ，小膠質(zhì)細胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng)，斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和神經(jīng)病理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。
但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源，如腫瘤壞死因子(T N F) ，一氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。
神經(jīng)小膠質(zhì)細胞的主要功能：
① 神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中。
② 當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞。
③ 膠質(zhì)細胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達C D -4陽性T細胞時表達抗原，能進行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細胞制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞經(jīng)C D 11b免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：梭形、多角形
傳代特性 ：屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：利多卡因(12m M )
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈梭形、多角形，在通蔚生物技術(shù)部標準操作流程下，細胞屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 特殊細胞消化一
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，37℃溫浴3min(不能超過5min) 。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5m l完全培養(yǎng)基稀釋消化液。
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞，吸出細胞懸液，經(jīng)1200rpm 離心5min，丟棄上清。
4) 用完全培養(yǎng)基重懸細胞，計數(shù)接種于相應(yīng)實驗器具內(nèi)，待細胞完全貼壁后開始試驗(預(yù)計2h 貼壁，12-24h 完全展開) 。
5) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 特殊細胞消化二
1) 若細胞無法消化，更換消化液為0. 25% 胰蛋白酶，按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然無法消化，加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化，采用無菌細胞刮，直接刮取細胞(此法不推薦，最后選擇，會造成細胞機械損傷死亡) 。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
