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021-54845833/15800441009
土壤α-半乳糖苷酶活性檢測試劑盒
測定意義
S-α-GAL能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
測定原理
S-α-GAL分解4-MUF -α-D-吡蝻半乳糖苷，產生熒光物質，通過測定熒光值升高速率來計算S-AGC活性。
自備用品
酶標儀、臺式離心機、恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液器、黑色96孔板和蒸餾水。
測定步驟
測定步驟
1、熒光酶標儀預熱30min以上，設置激發(fā)光波長 355 nm，測定波長 450nm。
2、加樣表
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試劑名稱 |
測定管 |
空白管 |
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震蕩條件下取勻待測液（μLL） |
200 |
- |
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蒸餾水（μL） |
- |
200 |
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試劑二（μL） |
200 |
200 |
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混勻， 30℃避光振蕩反應3h后， 3000g 4℃離心3min，取上清液200μL于黑色96孔板中，檢測熒光值，激發(fā)波長355nm，發(fā)射波長450nm。熒光值分別為A測定A空白，計算ΔA=A測定管-A空白管。 |
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預實驗的意義
比色法檢測試劑盒預實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調整；
5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。
注意
正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。
