氧消耗率熒光法檢測試劑盒
測定意義
細(xì)胞的氧氣主要在線粒體氧化磷酸化過程中被消耗,產(chǎn)生三磷酸腺苷(ATP),因此耗氧率(OCR: Oxygen Consumption Rate)是分析線粒體功能的一個重要指標(biāo)。
測定原理
本試劑盒提供一種熒光探針,對氧氣敏感,在封閉環(huán)境中細(xì)胞消耗氧氣探針熒光隨氧氣量減少而增加,通過檢測熒光值變化判斷細(xì)胞的氧消耗率。
自備儀器和用品
熒光酶標(biāo)儀、黑色96孔板(透明底)、可調(diào)式移液器、完全培養(yǎng)基、PBS(0.01M,pH7.4)。
試劑清單
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試劑名稱 |
規(guī)格 |
數(shù)目 |
貯藏 |
備注 |
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試劑一 |
探針0.55 mL |
×1 |
4°C,避光 |
試劑一為混懸液,可搖勻后分裝;試劑一使用前須混勻,使用細(xì)胞相應(yīng)的完全培養(yǎng)基將試劑一稀釋10倍, 配成工作液,配好的工作液8h內(nèi)使用有效。 |
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試劑二 |
密封液8 mL |
×1 |
4°C |
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注意事項
1. 加入板孔前的所有試劑須37℃預(yù)熱,檢測儀器提前預(yù)熱至37℃。
2. 按照操作步驟及時檢測,避免錯過最佳檢測時間。
3. 檢測過程建議維持檢測環(huán)境穩(wěn)定,避免晃動培養(yǎng)板。
4. 藥物可使用完全培養(yǎng)基或PBS(0.01M,pH7.4)稀釋后使用。
5. 試劑一和工作液容易沉降,使用前須混勻。
6. 試劑盒檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍。如果樣品中待測物濃度過高或過低, 請對樣本做適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s。
7. 若所檢樣本不在說明書所列樣本類型之中,建議先做預(yù)實驗驗證其檢測有效性。
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