黃嘌呤氧化酶抑制篩選檢測試劑盒

測定意義

黃嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase，XOD)是一種催化次黃嘌呤羥基化為黃嘌呤及黃嘌呤羥基化為尿酸的酶，由腎臟排泄，尿酸產(chǎn)生過多或排泄不足會導(dǎo)致高尿酸血癥。因此開發(fā) XOD 抑制劑可以用于治療高尿酸和通風(fēng)類疾病的研究。

測定原理

黃嘌呤氧化酶（XOD)催化黃嘌呤氧化生成尿酸和超氧陰離子自由基，接著與顯色劑反應(yīng)生成有色物質(zhì)，在加入抑制劑后，450nm顯色的產(chǎn)生會被抑制，根據(jù)抑制的程度來確定抑制劑的作用效果。

需自備的儀器和用品

酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制

試劑名稱	規(guī)格	數(shù)目	貯藏	備注
試劑一	液體120mL	x1	4℃	可用于提取稀釋樣品
試劑二	粉劑	x2	4℃,避光	加9mL試劑一超聲溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用
試劑三	液體	x2	-20℃,避光	避免反復(fù)凍融
試劑四	液體3mL	x1	-20℃,避光	避免反復(fù)凍融
試劑五	非布索坦	x1	-20℃,避光	5 mmol/L非布索坦，測定抑制率可作為參考，IC50約為3μmol/L

預(yù)實驗的意義

比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要

1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達(dá)處理的樣本）；

2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；

3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適；

4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題，以便于及時作出調(diào)整；

5、通過3 - 5組預(yù)實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍，指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。

注意

正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

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ELISA試劑盒