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HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞
細胞簡稱 ：H K-2
細胞別稱 ：H k-2;H K2;HumanKid n ey-2
細胞形態(tài) ：上皮細胞樣
生長特性 ：貼壁細胞
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ：M EM （含N EA A ）(PM 150410)＋10% F B S(164210-50)＋1%P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 ：2~ 3分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:2-1:4
細胞背景描述
H K -2細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導入H PV -16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有H PV -16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLX SN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-2；P si-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA 317，最后將PA 317細胞產(chǎn)生的病毒顆粒導入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G 418篩選轉(zhuǎn)導克隆。Southern和FISH 分析顯示，H K -2細胞來源于單克隆。PC R 檢測證實，H K -2細胞基因組中含有E 6/E 7基因。
供體年齡 ：成年
組織來源 ：腎，皮質(zhì)/近端小管
細胞類型 ：轉(zhuǎn)化細胞系
受體表達 ：epiderm algrow th factor(EG F),exp ressed
基因表達 ：alkaline phosphatase;gam m aglutam yltran sp ep tid ase;leu cineaminopeptid ase;acid phosphatase;cyto k eratin;alpha 3,beta 1in tegrin;fibron ectin
生物安全等級 ：2
細胞保藏中心 ：ATCC ; C RL-2190 BC RC ; 60097
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照通蔚生物細胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔毎幸蓡?，請及時跟我們聯(lián)系；對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
