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021-54845833/15800441009
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：倉鼠腎成纖維細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 ：BHK-21 [C-13]
細(xì)胞別稱 ：BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; BabyHamster Kidney from litter No. 21; BHK
細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣
生長特性 ：貼壁細(xì)胞P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95%；CO2，5%37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO液氮
完全培養(yǎng)基 ： MEM（含NEAA）(PM150410)＋10% FBS(164210-50)＋1%
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄；
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
8、消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例（密度） ： 1:3-1:4
換液頻次 ： 2~3次/周
細(xì)胞背景描述
細(xì)胞背景描述 ： BHK-21 [C-13]的親本細(xì)胞株是由I·A·Macpherson和M·G·P·Stoker于1961年3月從1日齡的倉鼠建立的。隨后84天連續(xù)培養(yǎng)，僅中斷8天進(jìn)行凍存，通過單細(xì)胞分離建立了13號(hào)克隆，即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]細(xì)胞可用作轉(zhuǎn)染宿主，用于表達(dá)包含選擇及擴(kuò)增標(biāo)記的DNA的載體。
倍增時(shí)間 ： ~12 hours
供體年齡 ： 1日齡
組織來源 ： 正常腎
細(xì)胞類型 ： 自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級(jí) ：1
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1.收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5.若觀察到異?；蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
