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描 述：
RAPA3G DNA 聚合酶為經(jīng)電子重構(gòu)架的第三代 TaqDNA 聚合酶，第三代 DNA 聚合酶具有高度的雜質(zhì)耐受性、長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力、高擴(kuò)增成功率、高產(chǎn)量，這些特點(diǎn)使得RAPA3G 系列產(chǎn)品可用于粗制樣品的直接擴(kuò)增，無(wú)需核酸純化步驟。該 PCR Mix 具有 5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的外切酶活性、3’-5’的外切酶活性，產(chǎn)物部分帶有”A“尾巴，部分為平末端，因此產(chǎn)物可用于 TA 克隆或平端克隆。
特點(diǎn)和用途：
（1）高雜質(zhì)耐受性：該 PCR Mix 可直接使用多糖多酚含量極高的葉片等材料進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，無(wú)需基因組提取。
（2）高效的快速 DNA 釋放劑：盡管該 PCR Mix 可以直接使用葉片進(jìn)行擴(kuò)增，但我們?nèi)匀煌扑]采用 DNA 釋放劑進(jìn)行樣本的快速前處理（約需要 5min，可高通量操作）。DNA 釋放劑的前處理，使得制備的 DNA 模板可以進(jìn)行多次、多基因擴(kuò)增，并長(zhǎng)期保存植物 DNA，經(jīng) DNA 釋放劑處理的樣本，在室溫條件下放置 1 個(gè)月，無(wú)任何后續(xù)影響，-20 可長(zhǎng)期保存。
（3） 快速 PCR：該酶具有 6kb/min 以上的擴(kuò)增速度，可顯著的縮短 PCR 的擴(kuò)增時(shí)間，在常規(guī)測(cè)試條件下，10s 的延伸時(shí)間可完成 1kb 的基因組 DNA 擴(kuò)增。
（4）粗制樣品的擴(kuò)增能力：擴(kuò)增能力>1.7kb。
（5） 高保真性能：該制品包含一定比例的 RAPA HiFi 超保真 DNA 聚合酶，因此其具有一定的保真性能（經(jīng)藍(lán)白斑測(cè)試，其保真性能約為 Taq DNA 聚合酶的 56 倍）。
（6）熱啟動(dòng)，防止非特異性擴(kuò)增：RAPA3G 系列產(chǎn)品均采用 HaiGene 專(zhuān)有的熱啟動(dòng)技術(shù)，確保 50 度以下完全無(wú)活性，僅有 95 度加熱 5min 以后才能恢復(fù)其活性，因此可最大限度的提高擴(kuò)增的特異性，減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。
儲(chǔ) 存：
長(zhǎng)期儲(chǔ)存置于-20°C 以下，可保存 2 年；短期使用置于 4°C（3 個(gè)月）保存。
使用方法：
1. DNA 釋放：
（1）采用加熱法：取 2-3mm 直徑葉片（白 Tip 頭上沿大?。?、1-10mg 果實(shí)等材料，放入到 0.2ml EP 管中，加入 50 μl 快速 DNA 釋放劑 A，于 PCR 儀中 98°C 加熱 5min，加熱完畢后加入 50 μl 快速 DNA 釋放劑 B，混合均勻，即可使用。
（2）采用鋼珠研磨法：取 2-3mm 直徑葉片、1-10mg 果實(shí)等材料，放入到 2ml EP 管中，加入 250 μl 快速 DNA 釋放劑 A 和 2-3 粒鋼珠，研磨 1-2min 成漿體裝。研磨完畢后加入 250 μl 快速 DNA 釋放劑 B，混合均勻，即可使用。
2. 按下表配制 PCR 反應(yīng)體系并混合均勻：
3. 請(qǐng)注意：
（1）該制品為熱啟動(dòng)制品預(yù)變性步驟 5min 不可縮短，否則 DNA 聚合酶無(wú)法恢復(fù)活性。（2）當(dāng)擴(kuò)增片段<1kb時(shí)，延伸時(shí)間使用 15s；擴(kuò)增片段 1-2kb 時(shí),延伸時(shí)間使用45s，擴(kuò)增片段 2-3kb 時(shí),延伸時(shí)間使用 1min，當(dāng)擴(kuò)增片段>3kb 時(shí)，請(qǐng)按照 2kb/min 的延伸時(shí)間進(jìn)行設(shè)置。(3)盡管該酶具有 6kb/min 的延伸速度，但按照 2kb/min 設(shè)置延伸時(shí)間的條件下，能獲得最高的產(chǎn)量。
注意事項(xiàng)：
(1)當(dāng)模板 GC 含量>70%時(shí)，請(qǐng)?zhí)砑?× Q-Solution。
(2)當(dāng)采用全血、血漿等蛋白含量極高的樣本時(shí)，擴(kuò)增完畢后可能會(huì)有變性的蛋白沉淀，請(qǐng)離心后再進(jìn)行點(diǎn)樣和電泳。
四、特別提示：
本公司的所有產(chǎn)品，僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
