BK病毒(polyomavirus BK,BKV)屬于多瘤病毒科,是DNA病毒。部分人攜帶BK病毒,多呈隱性感染,大部分成年人含有該病毒的抗體,免疫功能受損或抑制可引起病毒激活,如腎移植或妊娠期間。BK病毒的發(fā)生是當(dāng)人體免疫力低下的時(shí)候才會(huì)復(fù)制繁殖,免疫功能正常的人群BK病毒不會(huì)發(fā)作。BK病毒發(fā)作可引起出血性膀胱炎、輸尿管狹窄及間質(zhì)性腎小球腎炎等病癥。由于BK病毒目前沒有有效的治療手段,需要綜合性對癥治療。因此快速靈敏診斷BK病毒具有重要意義。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測BK病毒的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色蓋 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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BK病毒qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
1.5mL棕色管 |
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BK病毒qPCR陽性對照(1×10E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入162uL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以10E1-10E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2,1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL 熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號(hào)管中加入5 μL 1×10E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期2年
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