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傳染性脾腎壞死病病毒(Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus，ISKNV)屬于虹彩病毒科腫大細(xì)胞病毒屬，為雙鏈線狀DNA病毒，直徑為150nm，基因組長(zhǎng)度為111362 bp。傳染性脾腎壞死病病毒的潛伏期長(zhǎng)，致死率超過(guò)90%，主要感染淡水養(yǎng)殖的魚類，特別是鱖魚，病魚的主要癥狀包括魚體變黑、游泳異常、失去平衡。傳染性脾腎壞死病病毒引起的疾病目前沒(méi)有理想的治療措施，給養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，被中國(guó)等國(guó)家列為二類動(dòng)物疫病，因此快速檢測(cè)傳染性脾腎壞死病病毒具有重要的意義。為此，本公司以探針?lè)╭PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了傳染性脾腎壞死病病毒的檢測(cè)試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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傳染性脾腎壞死病病毒qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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傳染性脾腎壞死病病毒qPCR陽(yáng)性對(duì)照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
1份 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入165uL的超純水充分混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在6號(hào)管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在4號(hào)管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA，超純水，核酸純化試劑盒
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
