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溶藻弧菌探針法LAMP試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)屬弧菌科弧菌屬，是一種短桿狀革蘭氏陰性細(xì)菌。溶藻弧菌是一種重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)病原菌，致使多種魚、蝦和貝類感染，主要癥狀是運(yùn)動(dòng)力下降、皮膚灰暗、鱗片松散并且會(huì)伴隨體表潰瘍，肝臟、腸壁毛細(xì)血管和消化道等充血、充水。同時(shí)，人體也可通過食用污染后的水產(chǎn)食物引起急性胃腸炎等疾病，嚴(yán)重威脅人類健康。由于溶藻弧菌給世界各地的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大損失，還威脅人類身體健康，因此對溶藻弧菌的快速準(zhǔn)確鑒定有重要作用，為此本公司根據(jù)獨(dú)有的探針法LMAP技術(shù)，開發(fā)了簡單快捷的溶藻弧菌LAMP檢測試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
產(chǎn)品及特點(diǎn)
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)屬弧菌科弧菌屬，是一種短桿狀革蘭氏陰性細(xì)菌。溶藻弧菌是一種重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)病原菌，致使多種魚、蝦和貝類感染，主要癥狀是運(yùn)動(dòng)力下降、皮膚灰暗、鱗片松散并且會(huì)伴隨體表潰瘍，肝臟、腸壁毛細(xì)血管和消化道等充血、充水。同時(shí)，人體也可通過食用污染后的水產(chǎn)食物引起急性胃腸炎等疾病，嚴(yán)重威脅人類健康。由于溶藻弧菌給世界各地的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大損失，還威脅人類身體健康，因此對溶藻弧菌的快速準(zhǔn)確鑒定有重要作用，為此本公司根據(jù)獨(dú)有的探針法LMAP技術(shù)，開發(fā)了簡單快捷的溶藻弧菌LAMP檢測試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供DNA樣品。
2. 恒溫?cái)U(kuò)增，簡單快捷。
3. 含熒光探針，擴(kuò)增的專一性比染料法和電泳法更強(qiáng)。
4. 檢測靈敏性一般比PCR高10倍以上。
5. 一般30分鐘內(nèi)出結(jié)果，比PCR快。
6. 上樣量大，對20 μL的反應(yīng)體系，樣品加樣量高達(dá)到14 μL。
7. 內(nèi)含的dUTP-UNG可防交叉污染。
8. 提供無傳染性的陽性對照，便于分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
9. 本產(chǎn)品只能用于定性分析，不推薦用于定量分析。
10. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的探針法LAMP擴(kuò)增。
11. 只可用于科研。
規(guī)格及成分
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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4×LAMP MasterMix （探針法，待加酶） |
200μL |
0.5mL綠蓋管 |
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Bst DNA聚合酶2.0 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
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20×溶藻弧菌LAMP引物-探針干粉 |
50次 |
0.5 mL棕色管 |
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溶藻弧菌LAMP陽性對照（1E4拷貝/μL） |
250μL |
0.5mL黃蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產(chǎn)品采用5孔盒包裝 |
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使用方法
樣品DNA的制備
樣品DNA的制備
1. 用自選方法純化樣品DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)DNA提取試劑盒兼容，包括本公司的免提取的核酸釋放劑。
2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)樣品制備，包括一個(gè)樣品制備陽性對照（PC）和一個(gè)樣品制備陰性對照（NC）。PC用10 μL本試劑盒提供的陽性對照（1E4拷貝/μL）加一定量的水作為樣品制備PC，加水后的總體積跟所用核酸純化試劑盒所要求的起始樣本體積一致。NC用水替代。
LAMP反應(yīng)20μL體系
3. 反應(yīng)設(shè)置：第一次使用時(shí)請把所有Bst DNA聚合酶2.0（50 μL，本試劑盒提供）加入到 4×LAMP MasterMix（探針法，待加酶）中，輕柔顛倒20次充分混勻，然后再取用。如果有N+2個(gè)DNA純化樣品，則設(shè)置N+4個(gè)LAMP擴(kuò)增，增加LAMP擴(kuò)增陽性對照和LAMP擴(kuò)增陰性對照各1個(gè)。
4. 置于熒光定量PCR儀中65℃保溫60分鐘進(jìn)行擴(kuò)增，每分鐘在FAM通道采集一次熒光信號。
結(jié)果分析
結(jié)果分析
5. 樣品制備陽性對照和LAMP陽性對照的反應(yīng)液將有標(biāo)準(zhǔn)的S擴(kuò)增曲線，樣品制備陰性對照和LAMP陰性對照的反應(yīng)液將沒呈平線，沒有S曲線，否則提取實(shí)驗(yàn)或擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)無效。如果陽性和陰性對照結(jié)果正常，則實(shí)驗(yàn)有效，可以分析樣品的情況。樣品管的熒光曲線為S型，則說明樣品為陽性，如果為平線則說明待測樣品為陰性。典型的熒光檢測結(jié)果見下圖。左邊為陽性，右邊為陰性。
自備試劑
待測樣品
待測樣品
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期1年
