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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ：人卵巢癌組織源細胞
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：卵巢癌組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
人卵巢癌組織源細胞分離自患有卵巢癌病人的卵巢癌組織。卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤，是指生長在卵巢上的惡性腫瘤，其中90% ～95% 為卵巢原發(fā)性的癌，另外5% ～10% 為其它部位原發(fā)的癌轉移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難，就診時60% ～70% 已為晚期，而晚期病例又療效不佳。
因此，雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內膜癌居婦科惡性腫瘤的第三位，但死亡率卻超過宮頸癌及子宮內膜癌之和，高居婦科癌癥首位，是嚴重威脅婦女健康的最大疾患。卵巢由于組織學的特點，其癌的組織學類型之多居全身各器官首位。卵巢腫瘤主要的組織學類型如下：來源于卵巢的生發(fā)上皮，具體類型包括漿液性瘤、粘液性瘤、子宮內膜樣瘤、透明細胞瘤、 纖維上皮瘤(又稱勃勒納瘤) 、混合型上皮瘤等。
來源于卵巢的生殖細胞。主要類型有畸胎瘤、無性細胞瘤、胚胎性癌、內胚竇瘤、絨毛膜癌、混合性生殖細胞瘤。來源于卵巢的特異性性索間質，包括顆粒細胞瘤、卵泡膜細胞瘤、纖維瘤、卵巢睪九母細胞瘤、兩性母細胞瘤等。來源于原發(fā)在其它器官的惡性腫瘤，常見的包括消化道和婦科其它器官。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人卵巢癌組織源細胞經(jīng)檢測，純度可達90% 以上，且不含有H IV-1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：梭形、多角形
傳代特性 ：可傳5代左右。3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
人卵巢癌組織源細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
人卵巢癌組織源細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈梭形、多角形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳5代左右。3代以內狀態(tài)最佳。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
