波氏奧斯特線蟲(Ostertagia podjapolskyi)屬于毛圓科,是奧斯特屬的一種寄生蟲。主要寄生于羊、牛等反芻獸第四胃和小腸。常和其他毛圓科線蟲(捻轉(zhuǎn)血矛線蟲等)混合感染,引起綜合性線蟲病。流行于潮濕溫暖地帶。蟲體呈細(xì)線狀,中等大小,長度約6~10 mm。呈均勻棕色,又稱棕色胃蟲。蟲卵在外界發(fā)育而感染幼蟲,經(jīng)口感染牛羊。輕度感染不顯癥狀,嚴(yán)重感染時引起貧血、消瘦、下痢和間歇性便秘。嚴(yán)重威脅動物健康。因此快速檢測波氏奧斯特線蟲具有重要的意義。為此,本公司以探針法qPCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了波氏奧斯特線蟲的檢測試劑盒,它具有下列特點:
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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波氏奧斯特線蟲qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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波氏奧斯特線蟲qPCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165 μL的超純水充分混勻后得到引物-探針混合液再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
數(shù)據(jù)處理
1. 如果樣本制備陽性對照或PCR陽性對照(包括標(biāo)曲樣本)結(jié)果為陰性,則整個實驗無效,不需要分析數(shù)據(jù),需要重新樣本制備,重新進行PCR擴增或跟廠家聯(lián)系。如果樣本制備陰性對照或PCR陰性對照結(jié)果為陽性,說明環(huán)境污染,則整個實驗無效,不需要分析數(shù)據(jù),需要跟廠家聯(lián)系。
2. 如果陰性對照和陽性對照均正常,則實驗有效,可以進入后續(xù)分析。
3. 如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的log值為橫軸,以Ct值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品DNA濃度的log值,再推算出其濃度。
4. 如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照Ct必須沒有讀數(shù),或者大于或等于40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長,有典型擴增曲線,Ct值應(yīng)該小于40。對待測樣品,如果其Ct沒有讀數(shù)、大于或等于40則均為陰性,如果小于40則為陽性。
樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒
低溫運輸,-20℃保存,有效期1年
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