犬戊型病毒(Canine Hepatitis Virus E)是犬病毒性肝炎的病原體,犬病毒性肝炎是由犬I型腺病毒和和Ⅱ型腺病毒引起的一種病毒性傳染病,主要侵犯1歲以內的幼狗。除犬外,還見于一些野生動物。臨床上本病分為犬肝炎型和犬呼吸道型, 犬肝炎型:Ⅰ型腺病毒引起的免疫狀態(tài)決定了臨床表現(xiàn),當血清抗體滴度在1:4,1:16及1:500以上時,可分別表現(xiàn)為急性肝壞死,慢性肝炎會纖維化及局限性損害等。超急性型常于數小時內表現(xiàn)為消化道的一些癥狀而死亡;急性型則以高熱,咽喉炎,軀干及下腹部水腫,腹痛,嘔吐,腹瀉,出血性素質為主要表現(xiàn),病死率達25%~40%,恢復期出現(xiàn)眼前房色素層炎和角膜水腫(藍眼)。本病可侵犯各年齡、品種和性別的犬,但是1歲以內的幼犬發(fā)病率和病死率均較高。因此快速檢測犬戊型病毒具有重要的意義。為此,本公司以探針法qPCR技術為基礎開發(fā)了犬戊型病毒的檢測試劑盒,它具有下列特點:
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍蓋管 |
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犬戊型病毒qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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犬戊型病毒qPCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產品采用五孔盒包裝 |
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注 意:引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165 μL的超純水充分混勻后得到引物-探針混合液再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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稀釋標準曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
數據處理
1. 如果樣本制備陽性對照或PCR陽性對照(包括標曲樣本)結果為陰性,則整個實驗無效,不需要分析數據,需要重新樣本制備,重新進行PCR擴增或跟廠家聯(lián)系。如果樣本制備陰性對照或PCR陰性對照結果為陽性,說明環(huán)境污染,則整個實驗無效,不需要分析數據,需要跟廠家聯(lián)系。
2. 如果陰性對照和陽性對照均正常,則實驗有效,可以進入后續(xù)分析。
3. 如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的log值為橫軸,以Ct值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品的Ct值從標準曲線上推算出樣品DNA濃度的log值,再推算出其濃度。
4. 如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照Ct必須沒有讀數,或者大于或等于40。陽性對照必須有熒光對數增長,有典型擴增曲線,Ct值應該小于40。對待測樣品,如果其Ct沒有讀數、大于或等于40則均為陰性,如果小于40則為陽性。
樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒。
低溫運輸,-20℃保存,有效期1年。
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