KRAS基因的全名叫Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog,(Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物),它編碼一種小GTP酶,該酶屬于RAS超蛋白家族。KRAS基因位于1號染色體上。大約有30%的癌癥患者都存在KRAS突變,其中包括90%的胰腺癌,50%的結(jié)腸癌和25%的肺癌。在非小細(xì)胞肺癌中,KRAS基因突變占20~30%,多存在于肺腺癌中,肺鱗癌中比較罕見。在KRAS突變類型中,c.34G>T(p.G12C)突變最常見,約占所有KRAS突變的44%,最常見的癌種是非小細(xì)胞肺癌,因此快速檢測此突變具有重要的意義。為此本公司開發(fā)了簡單快捷的檢測該位點的點突變探針法qPCR檢測試劑盒,它具有下列特點:
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×點突變Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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rs121913530位點檢測引物-探針混合液干粉 |
50次 |
0.5 mL白色管 |
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rs121913530位點GG陽性對照(1×10E4拷貝/μL) |
250 μL |
1.5mL棕色管 |
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rs121913530位點TT陽性對照(1×10E4拷貝/μL) |
250 μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
無 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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使用方法
1. 一般的熒光定量PCR儀在基因分型的模式下,都可以自動根據(jù)兩個通道獲得的熒光值,計算每個樣品的比值(HEX值/FAM值),并描出散點圖。突變基因型的比值點將位于散點圖的X軸方向,正常基因型的比值將位于Y軸方向,雜合子基因型的比值將位于中間,陰性對照的比值將位于原點附近。如果陰性對照有任何信號,則表示污染,本次實驗無效,需要尋找原因。
2. 也可以手動整理下表進(jìn)行基因型判斷。首先設(shè)置閾值,F(xiàn)AM的閾值根據(jù)GG陽性對照的FAM熒光值設(shè)置,HEX的閾值根據(jù)TT陽性對照的HEX熒光值設(shè)置。如果陰性對照有任何信號,則表示污染,本次實驗無效,需要尋找原因。如果實驗有效,則分析樣品。如果樣品Ct值低于35,則算有擴增。高于35,則算無擴增。
樣品DNA
低溫運輸,-20℃保存,有效期1年
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