杜文黑基病毒(Duvenhage Virus, DUVV)是一種屬于麗沙病毒屬的病毒,其基因組為單股負(fù)鏈RNA,具有典型的麗沙病毒的基因組結(jié)構(gòu)和復(fù)制機(jī)制。該病毒主要感染的物種是蝙蝠。根據(jù)現(xiàn)有的資料,已從多種食蟲蝙蝠中分離出該病毒,特別是長翼蝠屬的蝙蝠。此外,它也曾導(dǎo)致少數(shù)人類感染病例,引起人類狂犬病樣的疾病,這些病例發(fā)生在南非和肯尼亞。感染該病毒后致死率非常高,對公共衛(wèi)生構(gòu)成嚴(yán)重威脅。因此,快速檢測杜文黑基病毒具有重要意義。為此,本公司以探針法qRT-PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了杜文黑基病毒的檢測試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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探針法qRT-PCR緩沖液 |
500μL |
0.5mL藍(lán)蓋管 |
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探針法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL紅蓋管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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杜文黑基病毒qRT-PCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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杜文黑基病毒qRT-PCR陽性對照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊 |
1份 |
1份 |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意: 引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。如果需要RNA陽性樣品,需要另外訂購。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
數(shù)據(jù)處理
樣品RNA,超純水,核酸純化試劑盒
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期1年
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