小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒(Calibrachoa Mottle Virus,CbMV)是RNA病毒,病毒大小在幾十到幾百納米之間,主要通過(guò)汁液傳播和接觸傳播。小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒主要感染小花矮牽牛等茄科植物,感染的植株生長(zhǎng)勢(shì)明顯減弱,表現(xiàn)為植株矮小、葉片稀疏等癥狀,葉片上出現(xiàn)斑點(diǎn)、黃化、壞死等癥狀,花朵可能出現(xiàn)畸形、變小、變色等癥狀,嚴(yán)重影響觀賞價(jià)值。小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒對(duì)種植者造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)危害,因此快速檢測(cè)小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒具有重要的意義。為此,本公司以探針?lè)╭PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒的檢測(cè)試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
規(guī)格及成分
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成分 |
規(guī)格 |
包裝 |
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2×Probe qPCR MasterMix |
0.5mL |
0.5mL本色管 |
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熒光PCR專用模板稀釋液 |
1mL |
1.5mL綠蓋管 |
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超純水 |
1mL |
1.5mL藍(lán)蓋管 |
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小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒qPCR引物-探針干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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小花矮牽牛斑點(diǎn)病毒qPCR陽(yáng)性對(duì)照(1E7拷貝/μL) |
50μL |
0.5mL黃蓋管 |
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使用手冊(cè) |
1份 |
無(wú) |
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本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
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注 意: 引物-探針干粉在使用前需要短暫離心,然后在離心管中加入165μL的超純水充分混勻后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品以1E1-1E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在6號(hào)管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號(hào)管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA,超純水,核酸純化試劑盒。
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期1年
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